Η τεχνική PCRH τεχνική PCR εξασφαλίζει την παραγωγή πολλών αντιγράφων ενός αρχικού τμήματος DNA. Απαραίτητη προϋπόθεση για την εφαρμογή της είναι να γνωρίζουμε την αλληλουχία των νουκλεοτιδίων στις άκρες του τμήματος του DNA που θέλουμε να αντιγράψουμε. Οι αλληλουχίες αυτές χρησιμοποιούνται για τη σύνθεση δύο συμπληρωματικών ολιγονουκλεοτιδίων που θα αποτελέσουν τα πρωταρχικά τμήματα για το σχηματισμό συμπληρωματικών τμημάτων DNA.
Σε δοκιμαστικό σωλήνα εισάγουμε το DNA που θέλουμε να πολλαπλασιάσουμε μαζί με τα συμπληρωματικά ολιγονουκλεοτίδια, ελέυθερα δεοξυριβονουκλεοτίδια , μια ειδική DNA πολυμεράση , ανθεκτική σε υψηλές θερμοκρασίες, που καταλύει τη σύνθεση του DNA και ιχνοστοιχεία που βελτιώνουν την απόδοση της. Θερμαίνοντας το δοκιμαστικό σωλήνα το DNA αποδιατάσσεται. Ακολουθεί η ψύξη του DNA έτσι ώστε τα ολιγονουκλεοτίδια να συνδεθούν στις συμπληρωματικές περιοχές του DNA κάθε αλυσίδας. Σταδιακά και με τη συμμετοχή της DNA πολυμεράσης γίνεται η σύνθεση δύο νέων αλυσίδων DNA συμπληρωματικών των αρχικών. Η διαδικασία επαναλαμβάνεται συμπληρώνοντας νέους κύκλους αντιγραφής (εικ. 1). Κάθε κύκλος αντιγραφής διαρκεί περίπου πέντε λεπτά.
Η ευαισθησία της τεχνικής PCR είναι σημαντική αφού επιτυγχάνει την ταχύτατη ανάλυση συγκεκριμένων περιοχών του DNA που βρίσκονται σε πολύ μικρή ποσότητα. Η μέθοδος PCR βρίσκει εφαρμογές στην ανίχνευση γενετικών ασθενειών και των αρχικών σταδίων ιικών μολύνσεων, στην εξακρίβωση της πατρότητας ή ακόμα και στην εγκληματολογία, όπου ελάχιστες ποσότητες αίματος ή άλλων ιστών μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ανάλυση του DNA.
 |
Εικόνα 1. Η τεχνική PCR
Εικόνα 1: ΑΛΕΠΟΡΟΥ-ΜΑΡΙΝΟΥ Β., ΑΡΓΥΡΟΚΑΣΤΡΙΤΗΣ Α., ΚΟΜΗΤΟΠΟΥΛΟΥ ΑΙΚ.,
ΠΙΑΛΟΓΛΟΥ Π. & ΣΓΟΥΡΙΤΣΑ Β., "Βιολογία θετικής κατεύθυνσης Γ' Τάξης Ενιαίου Λυκείου", σελ. 183 -
Προσαρμογή από το ΚΠΕ Καστοριάς
 |
 |